Produkt­validierung

Als ein Unternehmen von Wissenschaftlern wissen wir, wie wichtig es ist, mit Produkten zu arbeiten, die in Bezug auf ihre Spezifität, Selektivität, Aktivität, Stabilität und Leistung validiert worden sind.

Wir bemühen uns, sicherzustellen, dass jedes Produkt in mehrfachen Forschungsanwendungen und mit Stichproben, die von mehreren Spezies genommen wurden, validiert werden, und wir teilen diese Daten auf unserer Webseite. Unser Validationsprozess verwendet eine Vielfalt von Techniken, wie z.B. Western Blot, Immunzytochemie, ELISA, Durchflusszytometrie, Immunfluoreszenz, Immunpräzipation und Chromatin-Immunpräzipation.

Die Reaktivität eines Antikörpers mit Homologen verschiedener Spezies kann ein gewünschtes Merkmal sein, das das Produkt vielseitiger macht, oder eine unerwünschte Nebenwirkung. Wir teilen alle unsere Spezifitätsdaten auf unserer Website, damit Sie fundierte Kaufentscheidungen treffen können.

Abbildung 1: Anti-AIF1-Antikörper (A82670) (1 µg / ml) Färbung von Lysaten des menschlichen Frontalcortex (A), des Rattenhirns (B), des Mausgehirns (C) und des Schweinehirns (D) (35 µg Protein in RIPA-Puffer). Durch Chemilumineszenz nachgewiesen.

Abbildung 2: Western-Blot-Analyse von Ganzhirngewebslysaten unter Verwendung eines Anti-MAP2-Antikörpers (A85363) (1: 50.000, grün): [1] Proteinstandard (rot), [2] erwachsenes Rattenhirn, [3] embryonales E20-Rattenhirn, [4] Gehirn einer erwachsenen Maus.

Eine zunehmende Anzahl unserer Antikörper wird jetzt auf Spezifität und Selektivität gegen mehr als 19.000 menschliche Proteine in voller Länge auf genomweiten Proteinarrays getestet. Diese Arrays vergleichen die Bindung eines Antikörpers an ein Zielprotein und die Bindung an Off-Target-Proteine und bieten einen vollständigen Überblick über die Spezifität und Selektivität eines Antikörpers. Mit unseren Protein-Array-validierten Antikörpern können Forscher sicher sein, dass sie Präzisionswerkzeuge verwenden.

Abbildung 3: Analyse eines Proteinarrays mit mehr als 19.000 menschlichen Proteinen voller Länge unter Verwendung eines Anti-Beta-III-Spectrin-Antikörpers [SPTBN2 / 1584] (A253226). Z-Score und S-Score: Der Z-Score repräsentiert die Stärke eines Signals, das ein monoklonaler Antikörper (MAb) (in Kombination mit einem fluoreszenzmarkierten Anti-IgG-Sekundärantikörper) erzeugt, wenn er an ein bestimmtes Protein auf dem HuProt™ Array bindet . Z-Scores werden in Einheiten von Standardabweichungen (SDs) über dem Mittelwert aller auf diesem Array erzeugten Signale beschrieben. Wenn Ziele auf HuProt™ in absteigender Reihenfolge des Z-Scores angeordnet sind, ist der S-Score die Differenz (auch in SD-Einheiten) zwischen dem Z-Score. Der S-Score repräsentiert daher die relative Zielspezifität eines MAb zu seinem beabsichtigten Ziel; Ein MAb gilt als spezifisch für sein beabsichtigtes Ziel, wenn der MAb einen S-Score von mindestens 2,5 aufweist. Wenn beispielsweise ein MAb an Protein X mit einem Z-Score von 43 und an Protein Y mit einem Z-Score von 14 bindet, ist der S-Score für die Bindung dieses MAb an Protein X gleich 29.

Wir haben die Knockout-Validierung mit CRISPR / Cas9 als Teil unseres Standard-Antikörper-Validierungsprozesses integriert. Das Knockout-validierte Siegel zeigt an, dass die Spezifität eines Antikörpers durch Knockout-Validierung bestätigt wurde.

Abbildung 4: Western-Blot-Analyse von Extrakten aus normalen (Kontrolle) und ELAVL1-Knockout (KO) 293T-Zellen unter Verwendung eines Anti-ELAVL1-Antikörpers (A13545) bei einer Verdünnung von 1: 1000. Sekundärantikörper: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG (H + L) (HRP) (AS014) bei einer Verdünnung von 1: 10.000.

Abbildung 5: Western-Blot-Analyse von Extrakten aus normalen (Kontrolle) und S100A4-Knockout (KO) -HeLa-Zellen unter Verwendung eines Anti-S100A4-Antikörpers (A13562) bei einer Verdünnung von 1: 1000. Sekundärantikörper: Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG (H + L) (HRP) (AS014) bei einer Verdünnung von 1: 10.000.

Wir ermutigen alle unsere Kunden, Produktbewertungen einzureichen und mitzuteilen, was funktioniert und was nicht. Alle Bewertungen werden online veröffentlicht, sodass Wissenschaftler mehr über die Produktleistung, neue Anwendungen und optimale Verdünnungen erfahren und Bilder unserer Produkte bei der Arbeit sehen können.

Abbildung 6: Immunfluoreszenzanalyse von primär kultivierten Astrozyten unter Verwendung von Anti-GFAP-Antikörper (A85419) (grün) und DAPI-Kern-DNA-Färbung (blau). Daten, die in einer Kundenproduktbewertung übermittelt wurden.

Abbildung 7: Western-Blot-Analyse von Extrakten aus Rattenhirngeweben, die mit Anti-mTOR-Antikörper (A27028) (Spur A), Anti-FoxO3A-Antikörper (A26998) (Spur B), Anti-AKT (Phospho S473) -Antikörper (A27292) (Spur C) untersucht wurden und Anti-NLRP3-Antikörper (A14882) (Spur D). Daten, die in einer Kundenproduktbewertung übermittelt wurden.